Ny synthesis asidra nokleika dia atao amin'ny alàlan'ny fomba triglyceride sialic amide solid phase, izay ny fiafaran'ny 3′ amin'ny ADN dia tsy mihetsika eo amin'ny substrate solid phase ary ampiana ny nucleotide amin'ny lalana 3′ hatramin'ny 5′ mandra-pahatongan'ny ampahany ADN tadiavina. .Izany dia tsy mitovy amin'ny synthesis ADN amin'ny fampiharana ny ADN polymerase.
Ny fiafaran'ny 3′ amin'ny fototra voalohany dia tsy mihetsika amin'ny CPG mandritra ny synthesis, ny 5′-OH amin'ny fototra manaraka dia voaaro amin'ny di-p-tolyl trityl DMT, ny vondrona amino amin'ny fototra dia voaaro amin'ny asidra benzoika ary ny 3' -OH avy eo dia mavitrika miaraka amin'ny fitambarana amino phosphate.Ny fototra 1 amin'ny 5 5'-OH amin'ny fototra 1 sy 3'-OH amin'ny fototra manaraka dia mamorona triglyceride phosphite, izay avy eo oksidina miaraka amin'ny iodine ho triglyceride phosphate, ny mpiaro amin'ny fototra faharoa 5'-OH dia esorina amin'ny manampy asidra dichloroacetic DM cycles amin'ny alalan'ny fanampiana ny fototra manaraka, ary aorian'ny synthesis ny mpiaro amin'ny 5′-OH dia nesorina miaraka amin'ny malemy asidra Ny sombiny dia tapaka amin'ny solid resin amin'ny concentrate ammonium hydroxide, ny protectant dia nesorina tamin'ny fototra. miaraka amin'ny hydroxide ammonium concentré eo ambanin'ny hafanana, esorina ny hydroxide ammonium, maina ny sombiny, ary ny asidra nokleika dia diovina amin'ny chromatography ranoka na PAGE.
Dingana ny Oligo Synthesis
Deblocking
nyNy vondrona mpiaro DMT 5 farany dia nesorina tamin'ny fampidirana vahaolana TCA.
fampahavitrihana
Fampifangaroana ny activator amin'ny monomer oligonucleotide mba hamoronana ny monomer oligonucleotide mavitrika.
anankiray efa voavitrana
Ny vondrona hydroxyl 5-terminal dia mamaly amin'ny mpanelanelana oligonucleotide mavitrika amin'ny fanehoan-kevitry ny condensation anti-generative mba hamoronana fatorana triglyceride phosphite tsy miorina.
Capping
Ny fanampin'ny mpiasan'ny capping dia manao fihetsika fametahana acetylation miaraka amin'ny vondrona hydroxyl be loatra izay tsy tafiditra amin'ny fihetsiky ny condensation.
oxidation
Ny fanampiana ny vahaolana iode misy rano dia mamaly amin'ny fatorana phosphite tsy miorina amin'ny alàlan'ny oxidation mba hamorona fatorana triglyceride asidra phosphoric.
Cyanoethyl Cleavage
Ny vokatra asidra nucleic aorian'ny synthesis, miaraka amin'ny fanampiana ny vahaolana DEA hanesorana ny vondrona cyanoethyl amin'ny fatorana triglyceride phosphate.
Cleaved & Deprotection
Ny sombintsombin'ny asidra nokleary dia tapaka amin'ny mpitatitra dingana mafy amin'ny alàlan'ny fampidirana vahaolana ammonium hydroxide mifantoka ary avy eo mafana mba hanesorana ireo vondrona mpiaro amin'ny fatoran'ny hydrogène amin'ny fototra.
Fotoana fandefasana: Nov-21-2022