Ny antony mamaritra ny fahombiazan'ny synthesis ADN

Ao amin'ny ADN, RNA ary ny asidra nokleika tsy voajanahary, ny dingana Deprotection sy Coupling dia manana anjara toerana lehibe.

Ny dingana deprotection dia ny manala ny vondrona DMT amin'ny fanohanana mafy na ny vondrona hydroxyl 5' amin'ny nucleoside teo aloha miaraka amin'ny asidra organika, ary mampiseho ny vondrona hydroxyl ho an'ny dingana manaraka.Ny asidra trichloroacetic 3% ao amin'ny dichloromethane na toluene dia ampiasaina amin'ny fanatanterahana ny dingana deprotection.Ny fatran'ny asidra trichloroacetic sy ny fotoana deprotection (fotoana deblocking) no manjaka amin'ny fahadiovan'ny vokatra farany.Ny fifantohana ambany sy ny fotoana deblocking tsy ampy dia mamela vondrona DMT tsy mihetsika, izay mampihena ny vokatra ary mampitombo ny loto tsy ilaina.Ny fotoana lava deblocking dia mety hitarika ny depurine ny filaharana synthesized, mamorona ny loto tsy nampoizina.

Ny dingana Coupling dia saro-pady amin'ny votoatin'ny rano amin'ny solvents sy ny hamandoana eny amin'ny rivotra.Ny fifantohana ny rano ao amin'ny synthesis dia tokony ho latsaky ny 40 ppm, tsara kokoa noho ny 25 ppm.Mba hitazonana ny toetry ny synthesis anhydrous, ny synthesis ny asidra nukleika dia tokony hatao amin'ny tontolo hamandoana ambany, noho izany dia manoro hevitra ny mpanjifanay izahay hampiasa nyAmidites levona fitaovana, izay afaka mamongotra ny Phosphoramidite vovoka na menaka amin'ny acetonitrile anhydrous mba hisorohana ny fifandraisana amin'ny rivotra.

Ny antony mamaritra ny fahombiazan'ny synthesis ADN5
Ny anton-javatra mamaritra ny fahombiazan'ny synthesis ADN4

Koa satria levona ny phosphoramidites dia tsara kokoa amin'ny toe-javatra tsy misy rano, ary ny molekiola fandrika mba adsorb ny soritry rano ao amin'ny reagents sy amidite, dia mila manomana nyFandrika Molecular.Manoro hevitra izahay 2 g subsieve ho an'ny tavoahangy reagent 50-250ml, 5g ho an'ny tavoahangy 250-500ml, 10g ho an'ny tavoahangy 500-1000ml, ary 20g ho an'ny tavoahangy 1000-2000ml.

Ny famongorana ny phosphoramidites dia tokony hatao eo ambanin'ny atmosfera inert, ary ny fanoloana ny reagents activator sy acetonitrile dia tokony ho vita ara-potoana.Tokony hampiasaina haingana araka izay azo atao ny reagents Capping sy Oxidation, ny reagents misokatra dia manome fiainana kely kokoa, ary kely kokoa ny asa mandritra ny synthesis.


Fotoana fandefasana: Aug-09-2022